渗透剂沉降法测试 *** _渗透剂沉降法测试

测量蛋白质分子质量有哪些主要 ***

1.根据化学组成测定更低分子量用化学分析 *** 测出蛋白质中某一微量元素的含量，并假设分子中只有一个这种元素的原子，就可以计算出蛋白质的更低分子量。2.

渗透压法当蛋白质浓度不大时，可用以下公式：

M=RT/lim(∏/C)

其中R是气体常数(0.082)，T是绝对温度，∏是渗透压（以大气压计），浓度单位是g/L。3.

沉降速度法:

M=RTs÷D(1－Vρ)

其中s是沉降系数，D是扩散系数，

ρ是溶剂的密度，

V是蛋白质的偏微分比容。4.

SDS-PAGE法:

lgM=K1－K2μR

其中K1和K2是与试验条件有关的常数。用已知分子量的标准蛋白作标准曲线，即可求出未知蛋白的分子量。

如何选择适当的精练渗透剂是什么

1渗透性：泡制精练剂2g／L

1.1.a.不调整pH；b.调整pH12.0。

1.2.以标准帆布沉降法测试沉降速度(测试液500ml)。

1.3.至少测3次，取2次相近计算平均值。

2起泡性：(震荡法或通气法或果汁机法)

2.1.泡制精练剂2g／L取50cc放入带栓量筒中，上下摇动30下。

2.2.记录：即时、15秒、30秒、1分、2、3分钟泡沫高度。

3.洗净力：

3.1.泡制精练剂3g／L。

3.2.未退浆胚布。

3.3.浴比1：10.处理条件98℃×30分。

3.4.烘干后回潮O.5h以上测毛效(爬升速度)。

*毛效：取一块布长10cm，宽2.5cm。在1cm、2cm、3cm、5cm划一条线。记录爬升时间(速度快表示洗净力强)。

4.乳化性：

4.1.取109精练剂+3%Na0H 40ml+10g二甲基硅油。

4.2.放入量筒摇匀，记录：即时、2h、24h乳化层高度。

5.耐碱性：泡制精练剂2g／L

5.1.依所需片碱测试：0g/L、5g／L、10g／L、20g／L……。

5.2.观察是否浮油：记录：即时、2h、24h(一般需通过24h无浮油)。

6.耐温性：精练剂2g／L

6.1.a.不加碱；b加碱2g／L。

6.2.取试验液各400ml，于试验机内100℃x60分钟。

6.3.取出后观察是否浮油。

测定蛋白质分子量的常用 ***

粘度法

凝胶过滤层析法

SDS-凝胶电泳

凝胶渗透（过滤）色谱法

渗透压法

质谱法包括电喷雾离子化质谱技术和基质辅助激光解吸电离质谱技术

光散射法（多角度激光散射）

沉降法（超速离心法）